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北京普析通用紫外可見分光光度計(jì)儀器操作

北京普析通用紫外可見分光光度計(jì)儀器操作

對TU-19系列儀器的所有操作幾乎都是與PC聯(lián)機(jī)后通過UVWin軟件進(jìn)行的。在 對儀器進(jìn)行操作前請通過UVWin軟件使用說明書,詳細(xì)了解UVWin的使用。本章只針 對雙光束測量的特點(diǎn)作相關(guān)說明,并以三個(gè)真實(shí)的分析過程為例介紹使用TU-19系列 儀器的一般過程。

關(guān)于雙光束測量

什么叫雙光束

雙光束紫外可見分光光度計(jì)在光路設(shè)計(jì)上采用兩束能量基本一致的光同時(shí)分別對 樣品和參比進(jìn)行測量(如下圖3-1所示,R和S分別為參比和樣品兩路光束),通過參 比光束實(shí)時(shí)反饋補(bǔ)償測量系統(tǒng)的穩(wěn)定性,提高儀器的穩(wěn)定性和測量精度。

在儀器結(jié)構(gòu)上,雙光束儀器與準(zhǔn)雙光束和單光束最大的不同在于,雙光束儀器的樣 品室有兩路光,可以同時(shí)在兩路光上放置參比和樣品

使用雙光束儀器

雙光束儀器在使用上和單光束(或準(zhǔn)雙光束)的差別在于:單光束儀器在校零和測 量時(shí),分兩次將空白和樣品放入樣品池架中進(jìn)行測量;而雙光束儀器則是將空白和樣 品一次分別放入?yún)⒈群蜆悠穬陕烦丶苤?,然后進(jìn)行校零和測量操作。

在進(jìn)行暗電流校正時(shí),雙光束儀器的黑擋塊只需要放置在樣品光路的樣品池架上 進(jìn)行操作即可。

您可以通過下一節(jié)的幾個(gè)實(shí)例來熟悉本機(jī)在實(shí)際測量中的操作。

實(shí)例應(yīng)用

本節(jié)列舉了 19最基本應(yīng)用的三個(gè)實(shí)例

光度測量實(shí)例

維生素B1可以促進(jìn)碳水化合物和脂肪的代謝,提供神經(jīng)組織所需要的能量,防止 神經(jīng)組織和退化。預(yù)防和治療腳氣病。而實(shí)際藥廠出產(chǎn)的維生素B1品質(zhì)檢測需要 在400nm下測定其吸光度值,當(dāng)其值不超過0.020時(shí),為合格品。

應(yīng)用TU-19系列進(jìn)行維生素B1品質(zhì)檢測,需要使用UVWin軟件對待測樣品進(jìn)行 光度測量,具體操作步驟如下:

① 試劑配置

首先取1g維生素B1溶于10mL去離子水中作為樣品;然后,取兩個(gè)干凈配對的石 英比色皿,分別裝上去離子水作為參比溶液。

② 儀器開機(jī)

先打開與TU-19系列雙光束紫外可見分光光度計(jì)相連的計(jì)算機(jī),進(jìn)入Windows操 作環(huán)境。確認(rèn)樣品室中無擋光物后,再打開光度計(jì)的電源開關(guān),開啟UVWin操作軟件, 儀器進(jìn)入初始化過程。自檢無誤后,儀器進(jìn)主工作程序。開機(jī)預(yù)熱60mino

④暗電流校正

將隨機(jī)附帶黑擋塊放入樣品光路上的樣品池中,使用UVWin的暗電流校正功能進(jìn) 行儀器暗電流校正。暗電流校正完畢后取出黑擋塊。

提示:進(jìn)行暗電流校正可以消除儀器部分噪聲,保證樣品的測量結(jié)果更為準(zhǔn)確。您不需要在

每次測量時(shí)都進(jìn)行暗電流校正,一般在儀器環(huán)境發(fā)生變化時(shí)才必須進(jìn)行儀器的暗電流校正,所 謂的環(huán)境變化主要是指:環(huán)境溫度變化較大時(shí)、安裝位置改變、做高吸收度樣品時(shí)等。(建議您 在啟動(dòng)儀器預(yù)熱后,在進(jìn)行測量前進(jìn)行暗電流校正,保證數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性)。

⑤校零

將裝有去離子水的兩個(gè)配對石英比色皿分別放入樣品光路樣品池和參比光路樣品 池中,然后合上樣品室蓋,按“校零"按鈕進(jìn)行校零操作,此時(shí)在軟件主界面上方顯示的 實(shí)時(shí)吸光度值應(yīng)該為0.000 Abs或非常近似的值。

⑥樣品測量

取出放置于樣品光路樣品池中的比色皿,倒掉去離子水,用維生素B1樣品溶液清 洗至少3遍后盛入樣品溶液。將盛有樣品溶液的比色皿放置于樣品光路的樣品池架上, 合上樣品室蓋,按“開始"按鈕進(jìn)行測量。等待一次測量完成后,再次按“開始"可以測 量下一個(gè)數(shù)據(jù)。通過對多組測量數(shù)據(jù)取平均可以得到樣品的測量結(jié)果。

⑦結(jié)果分析

對測量得到結(jié)果,您可以保存為UVWin專用的文件格式,方便日后打開查看,也可 以打印輸出。

光譜掃描實(shí)例

維生素B12在361 nm處有特征吸收峰,因此在測量維生素B12光譜時(shí),測量者對 該波長下的吸光度值比較關(guān)注。下面就以維生素B12為例說明如何使用光譜測量。

采用TU-19系列雙光束紫外可見分光光度計(jì)對維生素B12進(jìn)行吸收峰的測量步驟 如下:

①試劑配置

取標(biāo)準(zhǔn)維生素B12注射液,按照B12與去離子水1:10的比例混合得到10mL稀釋 溶液。取兩個(gè)配對石英比色皿,都倒入去離子水(去離子水作為參比溶液)。

②儀器開機(jī)

先打開與TU-19系列雙光束紫外可見分光光度計(jì)相連的計(jì)算機(jī),進(jìn)入Windows操 作環(huán)境。確認(rèn)樣品室中無擋光物后,再打開光度計(jì)的電源開關(guān),開啟UVWin操作軟件, 儀器進(jìn)入初始化過程。自檢無誤后,儀器進(jìn)入主工作程序。開機(jī)預(yù)熱60min。


TEL:13798128437

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